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信帆生物:EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒的正確使用方法
產(chǎn)品名稱:EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒
貨號:XF-1601
規(guī)格:100T
儲存條件:-20℃
有效期:12個月
產(chǎn)品簡介
通過分析細(xì)胞增殖能力來判斷某些基因、藥物等對體外培養(yǎng)的細(xì)胞影響,或者分析不同狀態(tài)或刺激干預(yù)下生物個體組織細(xì)胞的生長和更新能力,是生命學(xué)科中一種常見且重要的評估手段。目前檢測細(xì)胞增殖的方法有很多,大部分是利用細(xì)胞產(chǎn)生的一些代謝酶類,來間接評定細(xì)胞的增殖活性(如 CCK-8 法、MTT法等),但是一些藥物或細(xì)胞本身狀態(tài)等因素都會對評定的結(jié)果造成一定影響。直接檢測細(xì)胞中 DNA 合成,
來判斷細(xì)胞的增殖是精確且有效的檢測方法。但是不論是最初使用的放射性標(biāo)記核苷摻入法,還是后續(xù)改進(jìn)的基于抗體檢測的 BrdU 法,都有著一定的自身局限性。
EdU(5-Ethynyl-2'- deoxyuridine,5-乙炔基-2'-脫氧嘧啶核苷)是一種含有一個乙炔基團(tuán)的胸腺嘧 啶脫氧核苷類似物,當(dāng)將其注射到動物體內(nèi)或者對體外培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行孵育,這些小分子能夠迅速擴(kuò)散到各個器官組織,并滲入到細(xì)胞中,可以在細(xì)胞增殖時期代替胸苷(T)摻入到新合成的 DNA 中。EdU 分子中的乙炔基團(tuán)能與熒光標(biāo)記的疊氮化合物探針在銅離子催化下發(fā)生“點擊"反應(yīng)形成穩(wěn)定的三唑環(huán),因此可以使新合成的 DNA 被相應(yīng)的熒光探針?biāo)鶚?biāo)記。EdU 檢測法同放射性標(biāo)記核苷摻入法相比,沒有放射性污染等限制因素;同 BrdU 檢測法相比,EdU 檢測法不需要 DNA 的變性處理,也不用抗原抗體反應(yīng),這大大減少了實驗的復(fù)雜性和時間,也使其變得更省時、更靈敏、更穩(wěn)定和更準(zhǔn)確。本試劑盒可用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞或動物組織中細(xì)胞增殖情況。本試劑盒中熒光探針為綠色熒光,最大激發(fā)波長為 491 nm,最大發(fā)射波長為 516 nm,處于增殖的細(xì)胞被標(biāo)記后,細(xì)胞核會顯示出明亮的綠色熒光,通過配套常規(guī)細(xì)胞核染料共同標(biāo)記細(xì)胞核(本試劑盒提供 Hoechst 33342 細(xì)胞核染料),可用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡等儀器直接觀察細(xì)胞增殖情況;也可以使用流式細(xì)胞儀檢測體外培養(yǎng)細(xì)胞群熒光強(qiáng)度,根據(jù)熒光強(qiáng)度,來判斷細(xì)胞周期中 S 期的 DNA 復(fù)制活性。
僅供科研實驗用,不做其他用途!
信帆生物:EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒的正確使用方法