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乙醇酸氧化酶測試盒的檢測原理是什么-信帆生物為您答疑解惑

點擊次數(shù):1740     更新時間:2019-08-21

乙醇酸氧化酶測試盒的檢測原理是什么-信帆生物為您答疑解惑

乙醇酸氧化酶(glycollic oxidase, GO)試劑盒

測定意義

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代謝中的關鍵酶,也是光下合成草酸的關鍵酶,

它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對研究光呼吸代謝過程及其調控具有重要意義。

測定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應生成乙醛酸苯腙,在

324nm 有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿。

試劑組成和配制

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 35mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存,臨用前加 10mL 雙蒸水溶解;用不完的試劑分裝后-20

保存,禁止反復凍融。

試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。

酶液提取

按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL

提取液),進行冰浴勻漿。12000g, 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

 

注意事項

1. 測定之前進行預實驗,若吸光值較高,請將樣品用提取液進行適當?shù)南♂屧贉y定,并在

計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。2. 色素含量較高的樣品,可在提取酶時加活性炭吸附。

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