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磷酸果糖激酶(PFK)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

磷酸果糖激酶又叫6-磷酸果糖激酶-1(英語(yǔ)Phosphofructokinase;PFK)是一類激酶,可作用于果糖-6-磷酸 (fructose 6-phosphate)。
磷酸果糖激酶(PFK)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

產(chǎn)品型號(hào):(PFK)

更新時(shí)間:2025-02-09

所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等

磷酸果糖激酶(PFK)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理:PFK催化果糖6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步一次催化NADH氧化生成NAD﹢,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反應(yīng)PFK活性。
磷酸果糖激酶又叫6-磷酸果糖激酶-1(英語(yǔ)Phosphofructokinase;PFK)是一類激酶,可作用于果糖-6-磷酸 (fructose 6-phosphate)。在糖酵解中和己糖激酶、丙酮酸激酶一樣催化的都是不可逆反應(yīng),因此這三種酶都有調(diào)節(jié)糖酵解途徑的作用。2,6-二磷酸果糖是它的強(qiáng)變構(gòu)激活劑。

可分為兩種,分別產(chǎn)生不同產(chǎn)物:
由磷酸果糖激酶1作用可得果糖-1,6-雙磷酸。 由磷酸果糖激酶2作用可得果糖-2,6-雙磷酸。
該酶會(huì)受到高濃度ATP的抑制,高的ATP濃度
磷酸果糖激酶在呼吸作用中的調(diào)控作用會(huì)使該酶與底物果糖-6-磷酸的結(jié)合曲線從S形變?yōu)殡p曲線型。而檸檬酸就是通過(guò)加強(qiáng)ATP的抑制效應(yīng)來(lái)抑制磷酸果糖激酶的活性,從而使糖酵解過(guò)程減慢。
因磷酸果糖激酶是糖酵解作用的限速酶,因此,對(duì)此酶的調(diào)節(jié)是調(diào)節(jié)酵解作用的關(guān)鍵步驟。

提取液:60mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存,臨用前加入2.8mL雙蒸水充分溶解備用;試劑三:液體×1支,-20℃保存,臨用前加入260ul雙蒸水充分溶解備用;試劑四:液體×1支,4℃保存,臨用前加入260ul雙蒸水充分溶解備用;
PFK工作液(可測(cè)25個(gè)樣)的配制:取19mL試劑一和1.26mL試劑二充分混勻。
產(chǎn)品說(shuō)明:
PFK(EC2.7.1.11)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,負(fù)責(zé)將果糖-6-磷酸和ATP轉(zhuǎn)化為果糖-1,6二磷酸和ADP,是糖酵解過(guò)程的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶之一。
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反映PFK活性。

磷酸果糖激酶(PFK)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

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